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技术(Technology)
FluorCam封关式GFP/Chl.荧光成像系统
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功夫:2020-02-17

作者:南宫NG28

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简介:

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  FluorCam封关式GFP/Chl.荧光成像系统可以为一系列利用到绿色荧光蛋白的分子和细胞生物学钻研提供服务 。在封关式荧光成像系统上装置了齐全由软件节造和电动驱动的滤波轮 ,以及一系列的滤光片组 ,能够对GFP、EGFP、wtGFP、YFP、BFP或者其它波段荧光蛋白和荧光素进行检测和成像 。

 

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  FluorCam封关式GFP/Chl.荧光成像系统也可用于检测植物发出叶绿素荧光的动态变动和空间散布 ,丈量Kautsky效应过程、荧光淬灭及其它瞬时荧光过程(瞬变)并提供2维荧光图像 。专门设计的硬件配置使得本系统可能自动转换成荧光蛋白、荧光素成像或叶绿素荧光检测成像 。该系统高度集成 ,并且能够进行样品的暗适应 。

 

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利用领域:

  • 荧光蛋白与荧光素的荧光检测
  • 基因转移和生物传感器技术
  • 转基因植物钻研
  • 分歧基因型抗性筛选
  • 植物——微生物交互作用钻研
  • 植物——原活泼物交互作用钻研
  • 植物光合个性和代谢错乱筛选
  • 生物和非生物胁迫的检测
  • 植物抗胁迫能力或者易感性钻研
  • 气孔非均一性钻研
  • 代谢混乱钻研
  • 长势与产量评估

 

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职能特点:

  • 操作轻便 ,丈量样品高度可调 ,集成了专用暗适应箱 ,方便被测植物的暗适应处置、操作等
  • 高分辨率CCD ,分辨率高达1392×1040像素 ,急剧精确捉拿叶绿素荧光和GFP
  • 可进行自动沉复成像丈量 ,可设置一个尝试法式(Protocols)自动循环成像丈量 ,成像丈量数据自动按功夫日期存入推算机(带功夫戳)
  • 带有Kautsky诱导效应、荧光淬灭分析等各类通用尝试法式(protocols) ,丈量分析参数达50多个
  • 可选配TetraCam彩色成像 ? ,最大成像面积20×25cm ,用于叶片或植物状态丈量分析

 

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典型样品:

  • 叶片 ,茎 ,种子 ,根 ,整株幼植物
  • 愈伤组织 ,造就皿中的幼苗
  • 果实和花朵
  • 蓝细菌 ,绿藻 ,细菌
  • 转基因动物

 

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技术参数:

  • 丈量参数:Fo, Fo’, Fs, Fm, Fm’, Fp, FtDn, FtLn, Fv, Fv'/ Fm' ,Fv/ Fm ,Fv',Ft,ΦPSII, NPQ_Dn, NPQ_Ln, Qp_Dn, Qp_Ln, qN, qP ,QY, QY_Ln, Rfd, ETR等50多个叶绿素荧光参数 ,每个参数均可显示2维荧荣耀色图像
  • 具备完整的自动丈量法式(protocol) ,可自由对自动丈量法式进行编纂

  a) Fv/Fm:丈量参数蕴含Fo ,Fm ,Fv ,QY等

  b) Kautsky诱导效应:Fo ,Fp ,Fv ,Ft_Lss ,QY ,Rfd蹬撰光参数

  c) 荧光淬灭分析:Fo ,Fm ,Fp ,Fs ,Fv ,QY ,ΦII ,NPQ ,Qp ,Rfd ,qL等50多个参数

  d) 光响应曲线LC:Fo ,Fm ,QY ,QY_Ln ,ETR蹬撰光参数

  e) PAR吸收与NDVI(选配)

  f) QA再氧化动力学(选配)

  g) GFP等静态荧光成像丈量

  h) OJIP急剧荧光动力学分析(选配):Mo(OJIP曲线初始斜率)、OJIP固定面积、Sm(对关关所有光反映中心所需能量的量度)、QY、PI等26个参数

  • 高分辨率TOMI-2 CCD传感器

  a) 逐行扫描CCD

  b) 最高图像分辨率:1360×1024像素

  c) 功夫分辨率:在最高图像分辨率下可达每秒20帧

  d) A/D 转换分辨率:16位(65536灰度色阶)

  e) 像元尺寸:6.45?m×6.45?m

  f) 运行模式:1)动态视频模式 ,用于叶绿素荧光参数丈量;2)快照模式 ,用于GFP蹬撰光蛋白和荧光染料丈量

  g) 通讯模式:千兆以太网

  • 光源板:4块大型高强度封装LED光源板 ,每个光源板由36颗LED阵列组成 ,光源板有效面积与成像面积一样13×13cm
  • 丈量光:标配617nm红光 ,其它波段可选 ,持续功夫10?s–100?s可调
  • 双色光化光: 2红光(617nm)+2蓝光(470nm或445nm) , Actinic1最大光强300?mol(photons)/m?.s ,Actinic2最大光强2000?mol(photons)/m?.s;最大光化学光可升级至3000?mol(photons)/m?.s
  • 鼓和光闪:最大光强4000?mol(photons)/m?.s ,可升级至6000 ?mol(photons)/m?.s
  • 成像面积:13×13cm ,可对植物叶片、植物组织、藻类、苔藓、地衣、整株植物或多株植物、96孔板、384孔板等进行成像分析
  • GFP丈量 ?椋7位滤波轮及专用滤波片 ,用于丈量GFP(绿色荧光蛋白)
  • PAR吸收丈量 ?椋ㄑ∨洌涸逗旃735nm(FAR)、红光650nm双色LEDs光源板及专用滤波片 ,用于丈量PAR吸收及NDVI
  • QA在氧化动力学成像分析(选配):可进行STF荧光动力学分析丈量 ,单周转光闪(STF)光强达120000 ?mol(photons)/m?.s in 100?s
  • OJIP急剧荧光动力学 ?椋ㄑ∨洌汗Ψ蚍直媛蚀1?s ,可测定分析OJIP曲线与二十几项有关参数蕴含:Fo、Fj、Fi、P或Fm、Vj、Vi、Mo、Area 、Fix Area、Sm 、Ss 、N(QA还原周转数量)、Phi_Po 、Psi_o 、Phi_Eo、Phi_Do、Phi_pav、ABS/RC(单元反映中心的吸收光量子通量)、TRo/RC(单元反映中心初始捕获光量子通量)、ETo/RC(单元反映中心初始电子传递光量子通量)、DIo/RC(单元反映中心能量消散)、ABS/CS(单元样品截面的吸收光量子通量)、TRo/CSo、RC/CSx(反映中心密度)、PIABS(基于吸收光量子通量的“机能”指数或称生计指数)、PIcs(基于截面的“机能”指数或称生计指数)
  • 紫表LED光源板(选配):365nm或385nm ,1)丈量多色荧光(详见FluorCam多光谱荧光成像系统);2)丈量wtGFP(野生型绿色荧光蛋白)、DAPI(4',6-二脒基-2-苯基吲哚 ,一种荧光染料)
  • 蓝色LED光源板(选配):470nm ,1)丈量EGFP(加强型绿色荧光蛋白);2)用于气孔职能钻研
  • 绿色LED光源板(选配):530nm ,丈量YFP(黄色荧光蛋白)
  • *丈量wtGFP、DAPI、EGFP、YFP蹬撰光蛋白或荧光染料还必要选配相应滤波片
  • FluorCam叶绿素荧光成像分析软件职能:具Live(实况测试)、Protocols(尝试法式选择定造)、Pre–processing(成像预处置)、Result(成像分析了局)等职能菜单
  • 客户定造尝试法式和谈(protocols):可设按功夫(如丈量光持续功夫、光化学光持续功夫、丈量功夫等)、光强(如分歧光质光化学光强度、鼓和光闪强度、调造丈量光等) ,具备专用尝试法式说话和剧本 ,用户也可利用Protocol菜单中的向导法式模版自由创建新的尝试法式
  • 自动丈量分析职能:可设置一个尝试法式(Protocol)自动无人值守循环成像丈量 ,沉复次数及距离功夫客户自界说 ,成像丈量数据自动按功夫日期存入推算机(带功夫戳)
  • 快照(snapshot)模式:通过快照成像模式 ,能够自由调节光强、快门功夫及活络度得到清澈凸起的植物样本稳态荧光和瞬时荧光图片
  • 成像预处置:法式软件可自动鉴别多个植物样品或多个区域 ,也可手动选择区域(Region of interest ,ROI) 。手动选区的状态可所以方形、圆形、肆意多边形或扇形 。软件可自动丈量分析每个样品和选定区域的荧光动力学曲线及相应参数 ,样品或区域数量不受限度(>1000)
  • 数据分析模式:具备“信号推算再均匀”模式(算数均匀值)和“信号均匀再推算”模式 ,在高信噪比的情况下选用“信号推算再均匀”模式 ,在低信噪比的情况下选择“信号均匀再推算”模式以过滤掉噪音带来的误差
  • 输出了局:高功夫解析杜撰光动态图、荧光动态变动视频、荧光参数Excel文件、直方图、分歧参数成像图、分歧ROI的荧光参数列表等
  • CCD检测器带宽:400–1000nm
  • 给光造度:静态或动态
  • Bios:固件可升级
  • 通讯方式:千兆以太网
  • 尺寸:471 mm(W)×473 mm (D)×512 mm (H)
  • 沉量:Appr. 40 kg
  • 电源输入:Appr. 1100 W
  • 供电电压:90–240 V

 

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典型利用:

 

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上海性命科学钻研院使用FluorCam丈量获得的GFP成像图 ,图中发出明亮色彩的植株即为表白了GFP的植株 ,其色彩越左袒红色 ,则批注表白的GFP更多

 

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钮扣珊瑚虫收缩-膨胀分歧时相(T1=0分 ,T2=30分 ,T3=60分)NDVI与GFP成像分析(Miguel ,2014)

产地:欧洲

 

 

 

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